Метод подсчета количества эритроцитов в крови с помощью камеры горяева

Разбавление крови с целью исследования

Определение количества эритроцитов состоит из нескольких последовательных действий. Первым этапом становится разведение определенного объёма крови в реагенте. Делается это в связи с огромным числом форменных элементов.

Прочтите также: Причины возникновения коарктации аорты у детей и взрослых, основные симптомы и лечение патологии

В качестве реагента чаще всего выступает раствор хлорида натрия концентрацией 0,9%. При необходимости альтернативой служит 5% раствор натрия цитрата. Процедуру разбавления крови выполняют в пробирке или в специальном смесителе, называемом меланжером.

Разбавление крови в меланжере

Меланжером называется изготовленный из стекла градуированный капилляр длинной 10 см с расширением на конце, внутри которого расположен шарик. Последний выполняет важную функцию – равномерное смешивание раствора и крови. Цвет шарика меланжерного капилляра будет красным, если он предназначен для эритроцитов, и белым – для работы с лейкоцитами.

Методика подсчета эритроцитов позволяет проводить процедуру исследования и со стабилизированной кровью, и с нестабилизированным материалом сразу после его забора у пациента.

Кровь набирают меланжерным капилляром до деления 0,5, после чего кончик смесителя очищают от крови с помощью марли либо ватки и следующим действием набирают разбавляющий раствор до деления 101. Перекрыв пальцами отверстия капилляра, полученный образец тщательно смешивают около 3 минут. В счётную камеру помещают четвёртую каплю, предварительно удалив первые три на марлю. Таким образом получают разбавление крови в 200 раз.

Разбавление крови в пробирке

При пробирочном методе разбавления крови исследуемый материал разводят в 200 раз следующим образом: 4 мл раствора хлорида натрия помещают в пробирку, после чего добавляют 0,02 мл крови.

Для этого забор материала производят пипеткой, кончик которой протирают ваткой или другой тканью. Образец крови помещают на дно пробирки, пипетку промывают ближе к поверхности раствором хлорида натрия. Готовый образец перемешивают и оставляют до дальнейшего этапа исследования, но менее чем на 3 часа.

Разное

Модель 851, 853

ТЕХНИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ И ИНСТРУКЦИЯ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ

Министерство медицинской промышленности
Главное управление медицинской техники
Ленинградское ордена Ленина и ордена Октябрьской Революции производственное объединение «Красногвардеец»

2. Технические данные

2.1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ КАМЕРЫ ГОРЯЕВА (мод. 851)

Площадь — 9 мм2
Глубина — 0,1 мм
Объем — 0,9 мм3

2.2. ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ КАМЕРЫ ФУКС-РОЗЕНТАЛЯ (мод. 853)

Площадь — 16 мм2
Глубина — 0,2 мм
Объем — 3,2 мм3

3. Состав изделия

3.1. В состав камеры Горяева входят:

а) камера ЭА7.211.401 — 1 шт.
б) стекло покровное ЭА7.240.401 — 5 шт.
в) футляр ЭА4.162.668 — 1 шт.
Эксплуатационная документация:
г) техническое описание и инструкция по эксплуатации ЭА0.000.851 ТО … 1 экз.

3.2. В состав камеры Фукс-Розенталя входят:

а) камера ЭА7.211.403 … 1 шт.
б) стекло покровное ЭА7.240.401 … 5 »
в) футляр ЭА4.162.668 … 1 »
Эксплуатационная документация:
г) техническое описание и инструкция по эксплуатации ЭА0.000.851 ТО … 1 экз.

4. Устройство и работа камер

Камеры состоят из толстого предметного стекла с нанесенными на них поперечными прорезями,
образующими три поперечно расположенные плоские площадки.

Средняя площадка продольной прорезью разделена на две, каждая из которых имеет выгравированную на ней сетку.
По обе стороны средней площадки в камере Горяева расположены две других на 0,1 мм (в камере Фукс-Розенталя на 0,2 мм)
выше средней. Плоскости этих площадок служат для притирания покровного стекла до появления так называемых Ньютоновских колец.
После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других остаются щели (капиллярные пространства),
через которые и заполняют камеру.

Принцип сеток один и тот же. Они разделены на то или иное число квадратов, различным образом сгруппированных.

Постоянной величиной во всех сетках является так называемый «малый квадрат», сторона которого равна 1/20 мм, следовательно, его площадь равна 1/400 мм2.

Сетка Горяева (рис. 1) содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом), разграфленных вертикально, горизонтально,
крест на крест и неразграфленных.

Большие квадраты сетки Фукс-Розенталя (рис. 2) не разграфлены, сгруппированы по 16 квадратов, причем каждая такая группа ограничена тройными линиями.

При работе с камерами их рабочие поверхности должны быть чистыми и сухими. Во время подсчета форменных элементов недопустимо наличие пузырей воздуха на сетке камеры, так как это мешает точности подсчета.

Подсчет форменных элементов крови и спинномозговой жидкости производится по методике, утвержденной Минздравом СССР.

Формула для подсчета кровяных телец в камере Горяева —
  x = (а · 400 · в) / б ,
где
x — искомое количество форменных элементов в 1 мм3;
а — сумма форменных элементов, сосчитанных в определенном объеме камеры;
б — количество сосчитанных малых квадратов;
в — разведение крови.

Формула для подсчета форменных элементов спинно-мозговой жидкости в камере Фукс-Розенталя при степени разведения 10/11 —
  x = (а · 11) / (3,2 · 10) ≈ a / 3 ,
где
x — количество форменных элементов в 1 мм3;
а — количество форменных элементов, подсчитанных в одной камере.

5. Правила хранения

После окончания работы следует обмыть счетную камеру дистиллированной водой и вытереть мягкой чистой тряпкой.

Камеры, уложенные в коробки, следует хранить в сухом помещении.

Объединение «Красногвардеец»
197022, Ленинград, Инструментальная ул., 3

См. также: Счетчик лабораторный СЛ-1.

Роль лимфоцитов в организме

Лимфоциты – это самая большая группа из всех разновидностей лейкоцитов. Они выполняют следующие функции:

• выработка антител, которые борются с патогенными микроорганизмами и запоминают их генетический материал;
• взаимодействие с патогенными микроорганизмами, их уничтожение различными методами (поглощение, выделение медиаторов);
• регулировка других клеток организма.

Лимфоциты также делятся на разновидности. Каждая из них выполняет определенную функцию.

• B-клетки – подтип, распознающий чужеродный белок, выделяющийся в ответ на его проникновение антитела. Они уничтожают патоген, запоминают его генетический материал, чтобы при следующем проникновении у человека не развилась острая реакция.
• Т-клетки – направлены против чужеродного микроорганизма, делятся на несколько разновидностей. Киллеры уничтожают патоген. Хелперы вырабатывают антитела. Супрессоры снижает иммунную активность.
• NK-клетки – распознают нарушения в собственных клетках организма. Способны уничтожать раковые, поврежденные, мутировавшие образования.

Элементы образуются в красном костном мозге. Они происходят из стволовых клеток. На каждом этапе дифференцировки их генетический материал перестраивается. Форменные элементы приобретают белковые молекулы, позволяющие им противостоять патогенным микроорганизмам, обезвреживать их.

В лабораторной диагностике определяется количество лимфоцитов. Если мануальный (ручной) подсчет лимфоцитов повышен, это означает, что в организме образовался инфекционный очаг. Сниженное число свидетельствуют о пониженной функции иммунной системы. Врач-лаборант оценивает параметры каждой клетки и внутреннюю структуру. Отклонение может свидетельствовать о продукции некачественных форменных элементов, развитии злокачественных процессов.

Определение содержания гемоглобина в одном эритроците (СГЭ)

В последнее время наряду с цветным показателем рассчитывают более достоверную абсолютную величину — содержание гемоглобина в одном эритроците — СГЭ. При расчете этого показателя весовое количество гемоглобина выражают в очень мелких единицах — микромикрограммах (мкмкг), или, что правильнее — пикограммах (пг). СГЭ получают умножением количества гемоглобина в грамм-процентах на 10 и делением на число эритроцитов в миллионах.

Лабораторная камера Горяева

, названная в честь русского врача, профессора Казанского университета Горяева Н.К., является специальным монолитным предметным стеклом, предназначенным для подсчета количества клеток в заданном объеме жидкости. Кроме того, используя камеру Горяева можно определить увеличение микроскопа. Камеры Горяева широко применяются в области клинических и биомедицинских исследований.

Популярные области применение камеры Горяева:

• Подсчет форменных элементов крови Подсчет эритроцитов
• Подсчет лейкоцитов
• Подсчет ретикулоцитов
• И т.п.

Подсчет форменных элементов мочи
Исследование эякулята – оценка количественных и качественных параметров сперматозодиов
Вычисление концентрации спор в вакцине
Подсчет ооцист в препарате
И т.п.

Камеры Горяева выпускаются в двух модификациях: двухсеточные (двухкамерные) и четырехсеточные (четырехкамерные). В определении цены камеры Горяева важную роль играет качество шлифовки стекла, метод нанесения сетки – лазерная гравировка или же вакуумное напыление.

Что собой представляет камера Горяева?

Камера Горяева есть не что иное, как прозрачное монолитное предметное стекло поперечными прорезями и нанесенной специальным образом микроскопической сеткой. В случае двухкамерной камеры Горяева мы имеем четыре прорези, образующие три поперечно расположенных площадки, при этом средняя площадка разделена продольной прорезью на две одинаковых камеры, на каждой из поверхности площадки которых нанесена сетка. В случае же четырехкамерной камеры Горяева мы получаем предметное стекло с пятью прорезями, образующих четыре площадки, при этом две внутренние дополнительно разделены продольной прорезью для получения четырех камер с нанесенной микроскопической сеткой на поверхности площадок.

Рассмотрим более подробно особенности сетки

. Специальная сетка наносится на внутренние площадки, расположенные ниже соседних боковых площадок на 0.1мм. Боковые площадки предназначены для притирания покровного стекла до появления Ньютоновских колец. Как правило, используют специальное покровное стекло для камеры Горяева с закругленными краями. После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других остаются щели (так называемые, капиллярные пространства), через которые и заполняют камеру. Что конкретно представляет собой сетка? Микроскопическая сетка камеры Горяева расчерчена на большие и маленькие квадраты, сгруппированные различными способами. Сетка Горяева содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом), разграфленных вертикально, горизонтально, крест-накрест и неразграфленных

При этом размеры малых делений клетки сетки составляют 0.05мм, а больших – 0.2мм. Важно, что малый квадрат со стороной 0.05мм во всех сетках является постоянной величиной

Не трудно рассчитать, что площадь малого квадрата равна 0.0025 мм2, а большого квадрата – 0.04мм2. Тогда получаем, что объем жидкости над квадратом, образованным большими делениями сетки Горяева, составляет 0.004 микролитра.

Подсчитав количество форменных элементов (ФЭ) над большим квадратом, можно подсчитать плотность данного типа клеток в суспензии по формуле:

где

X — количество ФЭ/мл, M- количество ФЭ над большим квадратом.

При работе с камерой Горяева важно следить, чтобы ее рабочие поверхности оставались сухими и чистыми. Кроме того, при подсчете форменных элементов нельзя допускать наличие воздушных пузырей на сетке камеры, так как они могут мешать точности подсчета

После работы с камерами Горяева следует выполнить их дезинфекцию одним из допустимых способов:

1. Погружение в 70%-ный раствор этилового спирта на 30 минут
2. Погружение в 4%-ный раствор формалина на 60 минут при комнатной температуре.

Приведем примеры применения камеры Горяева и некоторые формулы.

Что такое камера Горяева? Правила подсчета форменных элементов крови

Сегодня камера Горяева является одним из самых используемых приспособлений в лабораторной диагностике. С ее помощью можно подсчитать количество тех или иных кровяных клеток. Как известно, анализ крови крайне важен для процесса диагностики и лечения почти каждого заболевания.

Что такое Камера Горяева?

Столь известное и полезное приспособление было разработано и предложено русским врачом Н. К. Горяевым. Камера Горяева, по сути, представляет собой специфическое предметное стекло с нанесенной на него микроскопической сеткой.

Для чего используется эта камера? В первую очередь с ее помощью определяют количество кровяных клеток, в частности лейкоцитов и эритроцитов. Кстати, с ее же помощью можно определить увеличение используемого микроскопа. Формула для этого выглядит следующим образом:

В данном случае:

• Kg — это увеличение микроскопа;
• m2 — положение правой границы клетки камеры Горяева;
• m1 — положение левой границы;
• а — размер одной клетки, который является стандартным и составляет 0,05 мм;
• N — это количество клеток между измеряемыми границами камеры.

Строение камеры

Камера Горяева представляет собой не что инное, как предметное стекло (но намного толще обычного), разделенное поперечными бороздами на три части. Средняя часть стекла содержит специальную сетку для подсчета. Крайние же части камеры служат для притирания покровного стекла — таким образом, по центру создается закрытая камера с капиллярными пространствами по бокам, через которые она и заполняется жидкостью.

Что же касается сетки, то камера Горяева разделена на 225 больших квадратов равных размеров — расположены они в пятнадцать рядов. 25 больших квадратов дополнительно разделены на меньшие, по 16 в каждом. Длина каждой стороны этого маленького квадратика составляет 0,05 мм.

Подготовка к подсчету форменных элементов

Безусловно, в данном случае огромное значение имеет техника проведения лабораторного исследования. Конечно же, все поверхности камеры Горяева должны быть чистыми и сухими. После этого покровное стекло притирают так, чтобы можно было увидеть характерные радужные кольца

Крайне важно, чтобы в камере не было пузырьков воздуха, так как это может исказить результаты анализа

Естественно, для того чтобы подсчитать количество форменных элементов, для каждой разновидности кровяных клеток используются разные реактивы. Например, для подсчета эритроцитов используется 0,9% раствор натрия хлорида. В пробирке нужно смешать 8 мл раствора соли и 0,02 мл крови. Так, лаборант разбавляет кровь в 400 раз. Иногда разведение может быть большим.

Для того чтобы подсчитать количество лейкоцитов, нужно смешать 0,4 мл уксусной кислоты (берут 3% или 5% раствор) и 0,02 мл крови.

После того как компоненты перемешаются в пробирке, с помощью специальной пипетки набирают небольшое количество смеси и аккуратно заполняют камеру для счета (как правило, одной или двух капель будет вполне достаточно).

Как правильно рассчитать количество кровяных клеток?

Подсчет эритроцитов в камере Горяева осуществляется в пяти больших квадратах, что равно восьмидесяти малым. Для того чтобы избежать ошибки из-за неравномерного распределения образцов крови, выбирают квадраты, расположенные по диагонали

Отдельное внимание обращают на клетки, расположенные по краям, — здесь считают эритроциты на левой и верхней стенках, но не берут во внимание те, которые расположены на нижней и правой линиях

Для того чтобы определить количество эритроцитов в миллилитре крови, число клеток в пяти больших квадратах умножают на 20 000 (при разведении в 400 раз).

Лейкоциты в камере Горяева считают по-другому. Здесь нужно вычислить количество элементов по меньшей мере в сотне больших квадратов. Полученное количество делят на 1600, после чего умножают на 4000, а затем на 20 (степень разведения).

Работа № 1. Подсчет эритроцитов крови в камере Горяева

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 4Следующая ⇒

Оборудование:микроскоп, счетная камера Горяева, 4 мл 3% раствора хлорида натрия, капилляр от гемометра Сали, скарификатор, вата, спирт.

Цель работы:научиться определять количество эритроцитов в крови человека, оценивать результаты.

Ход работы:

1. Покровное стекло притирают к стеклу камеры Горяева до появления ньютоновских колец.

2. В пробирку налить 4 мл 3% раствора хлорида натрия.

3. Набрать в капиллярную пробирку от гемометра Сали до метки крови (0,02 мл).

4

Осторожно выдуть кровь в пробирку с 3% раствором хлорида натрия и ополоснуть капилляр этим же раствором. Содержимое пробирки тщательно перемешать

5. Концом круглой стеклянной палочки взять из пробирки, наклонив ее каплю крови и заполнить камеру Горяева.

6. Поместить камеру на предметный столик микроскопа под малое увеличение, найти сетку счетной камеры и перевести тубус микроскопа на большое увеличение.

7. Подсчитать количество эритроцитов в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, которые расположены по диагонали сетки. При подсчете используют правило Егорова: “относящиеся к данному квадрату считаются эритроциты, лежащие как внутри квадратика, так и на его левой и верхней границах”.

8. Количество эритроцитов вычисляется по формуле:

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратиках,

1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратиком,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратиков, в которых подсчитывают эритроциты.

Результаты:

Выводы:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЕМОГЛОБИНА

В КРОВИ МЕТОДОМ САЛИ

Определение количества гемоглобина в крови производится колориметрическим методом Сали. Для этого имеется специальный прибор колориметр.

Простейший тип колориметра – гемометр Сали, которым обычно пользуются для определения Нb в крови. Он состоит из трех пробирок одинакового диаметра.

Одна из них пустая, а в других, запаянных с обоих концов, содержится стандартный раствор солянокислого гематина, соответствующий высшему пределу нормы Нb 166,7 г/л. Все три пробирки вставлены в небольшой штатив, задняя стенка которого сделана из стекла молочного цвета. К гемометру приложена пипетка ёмкостью 0,02 мл (или 20 мм3).

Работа № 2. Определение количества гемоглобина в крови по способу Сали (гематиновый метод).

Оборудование:гемометр Сали, пипетка, скарификатор, 0,1 н раствор хлористоводородной кислоты, вата, спирт.

Цель работы:научиться определять количество гемоглобина по способу Сали и оценивать результаты.

Ход работы: в среднюю пробирку гемометра наливают 0,1 н раствор хлористоводородной кислоты до метки. Пипеткой от гемометра Сали набирают 0,02 мл крови (до метки) и выдувают на дно пробирки.

Содержимое пробирки перемешивают, оставляют на 5-10 минут для превращения гемоглобина в солянокислый гематин.

Цифра, стоящая на уровне мениска полученного раствора, указывают на содержание гемоглобина в исследуемой крови в г%. Для перевода в г/л полученную цифру умножают на 10. В норме концентрация гемоглобина (абсолютное содержание) у мужчин – 130-160 г/л, у женщин – 120-140 г/л. Сравнить полученный результат с нормой, оценить результат.

Результаты:

Выводы:

РАСЧЕТ ИНДЕКСОВ ЭРИТРОЦИТОВ.

Цветовой показатель характеризует соотношение между количеством гемоглобина крови и числом эритроцитов. Цветовой показатель позволяет оценить степень насыщения эритроцитов гемоглобином. Цветовой показатель здорового человека равен 0,85-1,05. Если цветовой показатель выше нормы – гиперхромия. Если ниже нормы – гипохромия.

Работа № 3. Вычисление индексов эритроцитов.

Цель работы:определить степень насыщенности эритроцитов гемоглобином, оценить результат.

Ход работы:

1. Цветной показатель (ЦП)или (Fi) фарб-индекс (Farb – цвет, index – показатель) относительное содержание гемоглобина в эритроцитах, рассчитывается по формулам:

ЦП= __________3*Hb (г/л)___________________

3 первые цифры числа эритроцитов в млн.

В нормеЦП =0,8-1,0 (у новорожденных – 0,9-1,3; до 1 года – 0,75-0,8; после 1 года – как у взрослых).

2. Среднее содержание гемоглобина в эритроците– СГЭ (MCH, НbЕ):

Вычисление СГЭ производится по формуле:

СГЭ= содержание гемоглобина(г/л)_

число эритроцитов в л

В норме 24-36 пг (10-12г), (у взрослых – 30 пг; у новорожденных – 33,3 пг; 5-6 мес. – 26,1пг)

Результаты:

Выводы:

⇐ Предыдущая1234Следующая ⇒

Рекомендуемые страницы:

Возможные причины искажения результата

Как и любой другой лабораторный анализ, подсчет эритроцитов требует тщательной подготовки и аккуратности в исполнении. Искажение результатов анализа может возникнуть вследствие целого ряда причин. Оборудование хранят в сухом месте. Любая лабораторная работа, связанная с кровью, выполняется в резиновых перчатках.

Для начала следует убедиться в правильности подготовки и использования камеры. Перед работой и по ее окончании устройство необходимо тщательно промывать дистиллированной водой и насухо протирать мягкой тканью. Покровное стекло должно быть подготовлено заблаговременно таким же образом.

Возможные причины, влияющие на достоверность результата:

• Некачественные реактивы, способные вызывать гемолиз.
• Формирование сгустка крови в материале.
• Неаккуратность в процессе забора крови в капилляр.
• Плохо обработанные пробирки и пипетки.
• Недобросовестная техника исполнения при работе с камерой и подсчете эритроцитов.
• Высчитывание клеток сразу же после заполнения камеры (необходимо выждать 1 минуту, чтобы они успели осесть на поверхность).

В последнее время все большую популярность получает метод подсчета эритроцитов с использованием электронных счетчиков автоматического типа. Такая тенденция вполне обоснованна, так как автоматизированный процесс исследования значительно точнее и менее трудоёмок.

Принцип действия данного оборудования основан на разном показателе электропроводности клеток крови и раствора, в котором они помещены. Специальное электромагнитное устройство регистрирует изменение уровня сопротивления электрической цепи, когда эритроциты движутся через отверстие капилляра. Уже через несколько секунд на цифровом табло высвечивается результат с высчитанным числом клеток.

Повышенный показатель красных кровяных клеток в анализе называется полицитемией. Данное состояние возникает вследствие патологий, характеризующихся потерей жидкости в организме, например при диарейном синдроме. Часто такое явление наблюдается на первых этапах инфекционных заболеваний, при отравлении токсичными веществами и прочем. Снижение же концентрации эритроцитов в крови известно как олигоцитемия. И зачастую такая патология проявляется во время различного вида анемии.

Подсчет лейкоцитов и эритроцитов в камере Горяева (методика)

Камера Горяева

Камера Горяева представляет из себя простое устройство для визуального подсчета форменных элементов крови под микроскопическим увеличением. Оно сконструировано на основе предметного стекла, имеющего специальные углубления для номинального объема крови, а также покровного стекла с нанесенной сеткой.

Различают несколько конструкций камеры Горяева в зависимости от количества камер (углублений для заполнения кровью), чаще всего в лабораториях применяются двухкамерные или четырехкамерные модели. Над каждой из камер находится специальная счетная сетка, нанесенная на покровное стекло методом лазерной гравировки либо при помощи микронапыления краски.

Приспособление сконструировано таким образом, что все имеющиеся камеры имеют равный объем, который указан в технической документации модели, их глубина и размеры секторов покровной сетки также стандартны. Это делает возможным переводить после подсчета форменных элементов их суммарные значения в единицы концентрации заданных клеток в объеме крови.

Описание сетки камеры Горяева

Сетка в камере Горяева

Покровное стекло имеет гравировку в виде сетки, большие квадраты которой имеют величину стороны в 1 мм. Чаще всего таких квадратов 9 над каждой счетной камерой, они расположены так, что образуют три столбца по три квадрата в каждом.

Те большие квадраты, что располагаются по периферии, разделены на 16 квадратов поменьше, длина и ширина которых равны 0,2 мм.

Стандартная глубина камеры под этими квадратами позволяет легко подсчитывать количество клеток в единицах объема, он равен для них 0,1 мм3 или 10-4 мл.

Большой квадрат, расположенный посередине, имеет дополнительные разделяющие линии, они нанесены так, что делят каждый из 16 средних квадратов еще на 16 самых маленьких. Их сторона равна 0,05 мм.

Методика подсчета лейкоцитов

При ошибке анализатора помогает камера Горяева

Для подсчета лейкоцитов в крови в современных клинических лабораториях чаще всего используются специальные автоматические анализаторы, методика подсчета при помощи камеры Горяева относится к редко применяемым из-за своей трудоемкости и низкой скорости анализа. Для того, чтобы верно определить концентрацию отдельных видов лейкоцитов, требуется врач лабораторной диагностики или фельдшер-лаборант, владеющий навыками работы с микроскопом.

Подсчет при помощи камеры Горяева оправдан в тех случаях, когда автоматический анализатор не способен верно идентифицировать клетки крови пациента.

Это случается при онкологических заболеваниях системы крови и некоторых других болезнях, при которых клетки имеют нетипичный вид и объем.

Лейкоциты должны быть подготовленными перед работой

Для подсчета отдельных видов лейкоцитов кровь разводят в несколько раз слабым раствором уксусной кислоты, при этом образцы без лейкоцитоза, как правило, следует разводить не менее чем в 20 раз, в случаях выраженного увеличения количества белых кровяных телец может потребоваться большее разведение. Для контрастирования изображения применяют окрашивание метиленовой синью.

После заполнения камер исследуемым объемом крови сверху накладывается покровное стекло сеткой и производится ее притирка, в ходе которой должны полностью исчезнуть пузыри воздуха между двумя стеклами. Заполненная камера помещается под микроскоп, причем целесообразно оставить ее неподвижной на 1-2 минуты для того, чтобы форменные элементы полностью прекратили движение и осели.

После этого на среднем увеличении (окуляр не менее чем х10) проводится подсчет отдельных видов лейкоцитов в не менее чем 100 квадратах.

Полученное число дает представление о количестве лейкоцитов в 1 мкл крови.

Методика подсчета эритроцитов

Соблюдение алгоритма позволяет произвести точный подсчет клеток

Исследуемую кровь разводят при помощи физиологического раствора минимум в 100 раз для того, чтобы стал возможен визуальный подсчет красных кровяных телец. При недостаточном разведении в камерах образуется двойной слой форменных элементов крови, что делает невозможным их определение.

После наложения покровного стекла и притирки проводят микроскопирование препарата при увеличении окуляром х10. Подсчет ведется во всех 5 больших квадратах, разделенных линиями на 16 секторов.

Расчет объемных значений проводят при помощи умножения полученного числа эритроцитов на степень разведения (чаще в 100 или 200 раз) и на 4000, затем проводят деление полученного числа на 80 (количество малых квадратов при подсчете). Полученное число характеризует количество эритроцитов в 1 мкл крови.